ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ АКТИВНОСТИ КАСПАЗЫ-3 В БИОПСИЯХ ПЕЧЕНИ ПАЦИЕНТОВ ПРИ МОНО- И СМЕШАННЫХ ИНФЕКЦИЯХ

Цель исследования – изучение активности проапоптотического сигнального белка каспазы-3 для выяснения особенностей регуляции апоптоза при хронических заболеваниях печени.

Материалы и методы. Проведен иммуногистохимический анализ активности каспазы-3 в биопсиях печени больных хроническим вирусным гепатитом В (n = 5) и в биопсиях печени пациентов со смешанной инфекцией (туберкулез, хронический вирусный гепатит С и вирус иммунодефицита человека) (n = 5). Морфологический и морфометрический анализы серийных микрофотографий выполнены с использованием цифровой аналитической системы (микроскоп Leica DM 2500, цифровая камера Leica DFС320 R2 и компьютер).

Результаты. Экспрессия каспазы-3 в виде темно-коричневой зернистости в ядрах и цитоплазме выявлена во всех тканевых элементах печени (в гепатоцитах, эпителии желчных протоков, эндотелиоцитах, купферовских клетках синусоидов, а также в лимфогистиоцитарных инфильтратах). Наибольшая активность каспазы-3 обнаружена в ядрах гепатоцитов. Во всех тканевых элементах печени экспрессия каспазы-3 была значительно выше в биопсиях печени пациентов со смешанной инфекцией. Характерно, что иммунореактивные гепатоциты не имели морфологических признаков апоптоза.

Заключение. Экспрессия каспазы-3 как проапоптотического сигнального белка может служить ранним маркером повреждения печени, в том числе возможности развития апоптоза.

1. Shi Y. Mechanisms of caspase activation and inhibition during apoptosis. Mol Cell 2002;9(3):459–70.

2. Bantel H., Ruck P., Schultze-Osthoff K. In situ monitoring of caspase activation in hepatobiliary diseases. Cell Death Differ 2000;7(5):504–5.

3. Bantel H., Lugering A., Poremba C. et al. Caspase activation correlates with the degree of inflammatory liver injury in chronic hepatitis C virus infection. Hepatology 2001;34(4 Pt 1):758–67.

4. Bantel H., Ruck P., Gregor M., Schulze-Osthoff K. Detection of elevated caspase activation and early apoptosis in liver diseases. Eur J Cell Biol 2001;80(3):230–9.

5. Knodell R.G., Ishak K.G., Black W.C. et al. Formulation and application of a numerical scoring system for assessing histological activity in asymptomatic chronic active hepatitis. Hepatology 1981;1(5): 431–5.

6. Ischak K., Baptista A., Bianchi L. et al. Histological grading and staging of chronic hepatitis. J Hepatol 1995;22(6):696–9.

7. Tokin I.B., Tokin I.I., Filimonova G.F. Computer image analysis of liver biopsy specimens in patients with heroin abuse and coinfection (tuberculosis, HCV, HIV). In: N. Tagaya (ed.). Liver biopsy – indications, procedures, results. 2012. Pp. 235–56.

8. McPartland J.L., Guzail M.A., Kendall C.H., Pringle J.H. Apoptosis in chronic viral hepatitis parallels histological activity: an immunohistochemical investigation using anti-activated caspase-3 and M30 cytodeath antibody. Int J Exp Pathol 2005;86(1): 19–24.

9. Piekarska A,. Kubiak R., Omulecka A. et al. Expression of tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand and caspase-3 in relation to grade of inflammation and stage of fibrosis in chronic hepatitis C. Histopathology 2007;51(5):597–604.

10. Salama H., Medhat I., El-Makhzangy H. et al. Detection of caspase-3 activity in sera of egyptian patients with chronic HCV and normal ALT level. Med J Cairo Univ 2009;77(4):237–42.

11. Tokin I.В., Hussar P., Filimonova G. et al. Features of the liver apoptosis in patients with chronic hepatitis C viral infection (HCV). The 7th international Cell Death Society Symposium “Targeting cell death pathways for human diseases”. Shanghai, China, 2008. 127 p.

12. Tokin I.B., Hussar P., Filimonova G. et al. Features of liver apoptosis in chronic hepatitis C virus infection. Papers on Anthropology 2009;18:361–71.

13. Буеверов А.О. Апоптоз и вирусные гепатиты. Вирусные гепатиты: достижения и перспективы 2001;1(11):12–4. [Buyeverov A.O. Apoptosis and viral hepatites. Viral hepatites: аchievements and outlooks 2001;1(11):12–4. (In Russ.)].